产品名称:MLE 重组大环内酯酶(Recombinant Macrolide Esterase)
品牌:ABIOCENTER™
EC编号:EC 3.1.1.-
CAS号:—
来源:重组大肠杆菌精密发酵(pET-28a-MLE-His,BL21(DE3))
分子量:~30.5 kDa(SDS-PAGE)
等电点pI:5.84
外观:白色至类白色冻干粉末,无菌即溶型
| 项目 | 指标 |
|---|---|
| 纯度(HPLC) | ≥95% |
| 酶活力 | ≥20 U/mg(冻干品) |
| 比活力 | ≥20 U/mg 蛋白 |
| 内毒素 | <0.1 EU/mg |
| 水分含量 | ≤3.0% |
| 微生物限度/无菌 | 符合药典要求 / 无菌 |
| 最适pH | 6.5–8.0 |
| 最适温度 | 35–40°C |
| 辅因子 | 无需外源;Ca²⁺/Mg²⁺可增强活性 |
底物范围:红霉素、阿奇霉素、罗红霉素、克拉霉素(14/15元大环内酯为主)
对16元大环内酯(泰乐菌素/螺旋霉素):中等活性(40–70%)
对非大环内酯抗生素:无交叉反应
Km(红霉素):约1.5×10⁻⁴ M
Km(阿奇霉素):约2.0×10⁻⁴ M
催化机制:α/β水解酶,Ser-Asp-His三联体,酯键水解开环失活
形态:无菌冻干粉,复溶即用
复溶:无菌水或缓冲液,轻柔溶解
保存(冻干品):2–8°C避光,有效期24个月
保存(复溶后):短期2–8°C/24h;长期-20°C分装,避免反复冻融(≤3次)
运输:冰袋保温(2–8°C)
抗生素无菌检查:中和残留抗生素,确保阳性菌生长
微生物限度检查:提高阳性菌回收率(≥70%)
环境生物修复:降解制药/养殖废水中大环内酯残留
耐药机制研究:模式酶,用于耐药基因功能验证
酶工程改造:亲本酶,用于定向进化/理性设计
抗生素效价测定:特异性消除干扰
外观、纯度(RP-HPLC)、分子量(SDS-PAGE/MS)、酶活力(HPLC底物转化法)、内毒素(LAL)、pH、蛋白浓度、微生物限度、无菌、水分(卡尔费休)
批间一致性:CV<3%