UCK重组尿苷胞苷激酶
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- 产品详情
- 产品参数
一、产品基本信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | UCK 重组尿苷-胞苷激酶（Recombinant Uridine-Cytidine Kinase） |
| 品牌 | ABIOCENTER™ |
| EC编号 | EC 2.7.1.48 |
| CAS号 | 9037-20-1 |
| 来源 | 重组大肠杆菌精密发酵表达（pET-28a-UCK-His） |
| 分子量 | ~28 kDa（SDS-PAGE检测） |
| 外观 | 无色至淡黄色澄清液体 |
| 产品形态 | 无菌液体，即用型 |
| 纯度（HPLC） | ≥ 95% |
| 酶活力 | ≥ 5000 U/mL（液体） |
| 比活力 | ≥ 200 U/mg 蛋白 |
| 内毒素 | < 0.1 EU/mg |
| 最适pH | 7.0 – 8.5 |
| 最适温度 | 37°C |
| 底物 | 尿苷（Uridine）、胞苷（Cytidine） |
| 辅因子 | ATP / GTP / Mg²⁺ |
| Km值（尿苷） | 约 2.5 × 10⁻⁴ M |
| Km值（胞苷） | 约 1.8 × 10⁻⁴ M |
| 溶解性 | 即用型液体，无需复溶 |
| 储存条件 | -20°C ± 5°C 密封避光保存 |
| 有效期 | 24个月（未开封） |
| 包装规格 | 1000 / 5000 / 10000 U/瓶，可定制 |
二、质量标准与质控数据
| 检测项目 | 方法 | 标准 | 频率 |
|---|---|---|---|
| 外观 | 目视检查 | 无色至淡黄色澄清液体 | 每批 |
| 纯度 | RP-HPLC | ≥ 95% | 每批 |
| 分子量 | SDS-PAGE / MS | ~28 kDa | 首批/定期 |
| 酶活力 | HPLC底物转化法 | ≥ 5000 U/mL | 每批 |
| 内毒素 | LAL法 | < 0.1 EU/mg | 每批 |
| pH值 | pH计 | 7.0 – 8.5 | 每批 |
| 蛋白浓度 | 紫外分光光度法 | 批次指定范围 | 每批 |
| 微生物限度 | 膜过滤法 | 符合药典要求 | 每批 |
| 无菌检查 | 薄膜过滤法 | 无菌 | 每批 |
| 批间一致性（CV） | — | < 3% | — |
三、酶学特性
| 参数 | 内容 |
|---|---|
| 酶活定义 | pH 7.5，37°C条件下，每分钟催化1 μmol尿苷磷酸化生成UMP所需的酶量为1单位（1 U） |
| 检测方法 | HPLC底物转化率法，以尿苷为底物，ATP为磷酸供体 |
| 底物特异性 | 天然嘧啶核苷（尿苷/胞苷）高效催化；部分核苷类似物（5-氟尿苷、吉西他滨等）中等催化；非天然核苷效率较低 |
四、产品核心特性
超高酶活力：≥5000 U/mL，显著优于传统微生物提取法（500–2000 U/mL）
无动物源性：重组大肠杆菌表达，无病原体污染风险
高纯度：HPLC ≥95%，单一组分，无杂蛋白/核酸酶干扰
即用型液体：无需复溶，开瓶即用
双底物特异性：同时高效催化尿苷→UMP和胞苷→CMP
辅因子优化：配方已含优化ATP及Mg²⁺体系
批间一致性好：CV < 3%
五、应用领域
| 应用场景 | 作用 |
|---|---|
| 核苷酸原料药酶法合成 | 催化尿苷→UMP、胞苷→CMP，绿色酶法生产 |
| 体外诊断试剂 | 核苷酸代谢检测试剂盒的核心偶联酶 |
| UMP/CMP标准品制备 | 一步酶法合成高纯度核苷酸标准品 |
| 前药活化研究 | 核苷类似物前药磷酸化为活性单磷酸形式 |
| 合成生物学代谢工程 | 构建UMP/CMP合成途径，底盘细胞改造 |
| 酶催化工艺开发 | 磷酸化反应条件优化与放大 |
六、使用说明要点
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 操作流程 | 解冻→混匀→分装→准备反应体系→加酶反应（37°C） |
| 推荐用量 | 核苷酸合成：100–500 U/L；IVD：0.1–1 U/mL；前药研究：1–10 U/mL |
| 缓冲液 | Tris-HCl或磷酸盐缓冲液（pH 7.0–8.0） |
| 辅因子 | ATP 1–5 mM，Mg²⁺ 5–10 mM（酶液配方已预优化） |
| 冻融管理 | 避免反复冻融（≤3次），建议分装保存 |
| 反应监控 | 推荐HPLC实时监测底物转化率 |
七、储存与运输
| 项目 | 条件 |
|---|---|
| 长期储存 | -20°C ± 5°C，密封避光 |
| 短期储存（解冻后） | 2–8°C，48小时内使用 |
| 运输条件 | 冰袋保温运输（2–8°C） |
| 有效期 | 未开封24个月 |
| 容器 | 无菌聚丙烯瓶或玻璃瓶，铝箔封口 |
八、与传统UCK对比
| 维度 | 传统微生物提取UCK | ABIOCENTER™ 重组UCK |
|---|---|---|
| 来源 | 微生物细胞破碎提取 | 重组大肠杆菌精密发酵 |
| 产品形态 | 冻干粉末，需复溶 | 无菌液体，即用型 |
| 酶活力 | 500–2000 U/mL | ≥5000 U/mL |
| 纯度 | 含多种杂蛋白 | ≥95%，单一组分 |
| 批间差异 | 受菌株影响大 | CV < 3% |
| 辅因子 | 需自行添加 | 已优化，即开即用 |
