PPK2 重组多聚磷酸激酶
PPK2 重组多聚磷酸激酶
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一、产品核心信息

项目内容
产品名称PPK2 重组多聚磷酸激酶(Recombinant Polyphosphate Kinase 2)
品牌ABIOCENTER™
EC编号EC 2.7.4.1
CAS号9026-44-2
来源重组大肠杆菌精密发酵表达(pET-28a-PPK2-His)
分子量~38 kDa(SDS-PAGE)
外观无色至微黄澄清液体
产品形态无菌液体,即用型(可选冻干粉)
纯度(HPLC)≥ 95%
比活力≥ 150 U/mg 蛋白
内毒素< 0.1 EU/mg
最适pH7.0–8.5
最适温度37°C(30–45°C仍具较高活性)
辅因子Mg²⁺已内置,无需额外添加
底物特异性以多聚磷酸盐(PolyP)为磷酸供体,催化 ADP → ATP
储存条件-20°C ± 5°C 密封避光保存
有效期24个月(未开封)
包装规格100 U / 500 U / 1000 U / 5000 U/瓶,支持定制

二、产品特性亮点

  • 高比活力:≥150 U/mg,较传统提取法提升2–8倍

  • 无动物源性:重组表达体系,无病原体污染风险

  • 高纯度:HPLC ≥95%,背景干净

  • 辅因子内置:Mg²⁺已包含,开瓶即用

  • 双形态可选:无菌液体(即用型)或冻干粉(高稳定性)

  • 批间一致性:CV < 3%,标准化工艺保障

  • 广谱底物:可催化ADP→ATP,亦适用于GDP→GTP、CDP→CTP等

三、质量标准与质控

检测项目方法标准
外观目视检查无色至微黄澄清液体
纯度RP-HPLC≥ 95%
分子量SDS-PAGE/MS~38 kDa
比活力偶联酶法/HPLC法≥ 150 U/mg
内毒素LAL法< 0.1 EU/mg
pH值pH计7.0–8.0
微生物限度膜过滤法符合药典要求
无菌检查薄膜过滤法无菌

酶活定义:在pH 7.5、37°C条件下,1分钟内催化生成1 μmol ATP所需的酶量为1个单位(U)。

四、主要应用场景与推荐用量

应用场景推荐用量备注
ATP再生系统1–10 U/mL需确认PolyP链长与浓度
酶法催化合成0.5–5 U/mL优化与目标酶的比例
核苷酸药物合成1–5 U/mL配合NMPK/NDK使用
体外诊断试剂按开发方案确定需方法学验证
合成生物学代谢工程0.5–10 U/mL考虑产物抑制
科研ATP供应0.1–2 U/mL37°C预孵育10分钟

五、使用步骤

  1. 解冻:室温或2–8°C解冻至澄清,避免反复冻融

  2. 混匀:轻柔颠倒混匀,勿剧烈震荡

  3. 分装:按单次用量分装,剩余部分继续-20°C保存(冻融≤3次)

  4. 使用:确认澄清后加入反应体系,记录批号

六、储存与运输

项目要求
液体品储存-20°C ± 5°C,密封避光
冻干粉储存-20°C ± 5°C,复溶后同液体品
短期储存(解冻后)2–8°C,48小时内使用
运输条件冰袋保温(2–8°C);冻干粉可常温
保质期未开封24个月

七、注意事项

  • 首次使用须进行方法学验证,确定最佳酶量与PolyP浓度

  • 反应温度不宜超过45°C

  • 最适pH为7.0–8.5,需使用适当缓冲液

  • 避免与强氧化剂、重金属离子、EDTA、SDS等混合

  • 建议使用链长 n=25–75 的多聚磷酸盐

  • 若体系含高浓度EDTA或螯合剂,需补充Mg²⁺