| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | PPK2 重组多聚磷酸激酶(Recombinant Polyphosphate Kinase 2) |
| 品牌 | ABIOCENTER™ |
| EC编号 | EC 2.7.4.1 |
| CAS号 | 9026-44-2 |
| 来源 | 重组大肠杆菌精密发酵表达(pET-28a-PPK2-His) |
| 分子量 | ~38 kDa(SDS-PAGE) |
| 外观 | 无色至微黄澄清液体 |
| 产品形态 | 无菌液体,即用型(可选冻干粉) |
| 纯度(HPLC) | ≥ 95% |
| 比活力 | ≥ 150 U/mg 蛋白 |
| 内毒素 | < 0.1 EU/mg |
| 最适pH | 7.0–8.5 |
| 最适温度 | 37°C(30–45°C仍具较高活性) |
| 辅因子 | Mg²⁺已内置,无需额外添加 |
| 底物特异性 | 以多聚磷酸盐(PolyP)为磷酸供体,催化 ADP → ATP |
| 储存条件 | -20°C ± 5°C 密封避光保存 |
| 有效期 | 24个月(未开封) |
| 包装规格 | 100 U / 500 U / 1000 U / 5000 U/瓶,支持定制 |
高比活力:≥150 U/mg,较传统提取法提升2–8倍
无动物源性:重组表达体系,无病原体污染风险
高纯度:HPLC ≥95%,背景干净
辅因子内置:Mg²⁺已包含,开瓶即用
双形态可选:无菌液体(即用型)或冻干粉(高稳定性)
批间一致性:CV < 3%,标准化工艺保障
广谱底物:可催化ADP→ATP,亦适用于GDP→GTP、CDP→CTP等
| 检测项目 | 方法 | 标准 |
|---|---|---|
| 外观 | 目视检查 | 无色至微黄澄清液体 |
| 纯度 | RP-HPLC | ≥ 95% |
| 分子量 | SDS-PAGE/MS | ~38 kDa |
| 比活力 | 偶联酶法/HPLC法 | ≥ 150 U/mg |
| 内毒素 | LAL法 | < 0.1 EU/mg |
| pH值 | pH计 | 7.0–8.0 |
| 微生物限度 | 膜过滤法 | 符合药典要求 |
| 无菌检查 | 薄膜过滤法 | 无菌 |
酶活定义:在pH 7.5、37°C条件下,1分钟内催化生成1 μmol ATP所需的酶量为1个单位(U)。
| 应用场景 | 推荐用量 | 备注 |
|---|---|---|
| ATP再生系统 | 1–10 U/mL | 需确认PolyP链长与浓度 |
| 酶法催化合成 | 0.5–5 U/mL | 优化与目标酶的比例 |
| 核苷酸药物合成 | 1–5 U/mL | 配合NMPK/NDK使用 |
| 体外诊断试剂 | 按开发方案确定 | 需方法学验证 |
| 合成生物学代谢工程 | 0.5–10 U/mL | 考虑产物抑制 |
| 科研ATP供应 | 0.1–2 U/mL | 37°C预孵育10分钟 |
解冻:室温或2–8°C解冻至澄清,避免反复冻融
混匀:轻柔颠倒混匀,勿剧烈震荡
分装:按单次用量分装,剩余部分继续-20°C保存(冻融≤3次)
使用:确认澄清后加入反应体系,记录批号
| 项目 | 要求 |
|---|---|
| 液体品储存 | -20°C ± 5°C,密封避光 |
| 冻干粉储存 | -20°C ± 5°C,复溶后同液体品 |
| 短期储存(解冻后) | 2–8°C,48小时内使用 |
| 运输条件 | 冰袋保温(2–8°C);冻干粉可常温 |
| 保质期 | 未开封24个月 |
首次使用须进行方法学验证,确定最佳酶量与PolyP浓度
反应温度不宜超过45°C
最适pH为7.0–8.5,需使用适当缓冲液
避免与强氧化剂、重金属离子、EDTA、SDS等混合
建议使用链长 n=25–75 的多聚磷酸盐
若体系含高浓度EDTA或螯合剂,需补充Mg²⁺