NCDN 重组蛋白
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一、产品概述
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | Neurochondrin 重组蛋白（NCDN / Norbin） |
| 产品编号 | AB-P016 |
| 基因编码 | NCDN 基因 |
| 蛋白性质 | 富含亮氨酸的神经元胞质蛋白 |
| 氨基酸数 | 729 个氨基酸 |
| 分子量 | 约 75 kDa |
| 进化保守性 | 人/鼠/大鼠同源性 >90% |
| 生物学功能 | 突触后信号调控关键分子，负调控 CaMKII 磷酸化，与 mGluR5 相互作用，调控突触可塑性、空间学习及运动协调 |
| 组织表达 | 脑组织高度表达（RPKM 97.7），尤其在海马锥体细胞、小脑 Purkinje 细胞及杏仁核神经元中富集 |
| 基因突变关联 | NCDN 基因突变可导致神经发育障碍伴婴儿癫痫性痉挛（NEDIES） |
| 临床相关性 | 抗 NCDN 抗体与自身免疫性菱脑炎密切相关，表现为亚急性至慢性进展的小脑性共济失调及脑干症状（眼球运动异常、吞咽困难、恶心呕吐）；部分患者伴脊髓病、急性精神病或周围神经病变 |
| IFA 染色模式 | 海马 CA3 层及透明层突触型特征性染色，小脑 Purkinje 细胞及分子层、杏仁核神经元显著着色 |
| 流行病学 | 全球文献报道约 12 例，绝大多数为非副肿瘤性，仅 1 例与子宫内膜癌相关 |
| 治疗反应 | 对免疫治疗（皮质类固醇、静脉注射免疫球蛋白、血浆置换等）反应不一，多数可获得临床稳定或部分改善，但长期预后较差 |
| 表达系统 | HEK293 真核表达系统 |
| 纯化方式 | 多步亲和层析纯化 |
| 产品特点 | 保留蛋白天然构象与免疫反应性 |
二、产品参数
| 参数项 | 具体内容 |
|---|---|
| 蛋白名称 | Neurochondrin (NCDN / Norbin) 全长 |
| 基因名称 | NCDN（Gene ID: 23154） |
| 基因位置 | Chr 1p34.3 |
| UniProt 编号 | Q9UBB6 |
| 氨基酸数 | 729 aa（全长 1-729） |
| 分子量 | ~75 kDa（SDS-PAGE 测定） |
| 表达系统 | HEK293 细胞 |
| 标签 | N-terminal His-tag |
| 纯度 | >90%（SDS-PAGE 测定） |
| 缓冲液成分 | 20 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 10% glycerol, pH 8.0 |
| 内毒素水平 | <1 EU/μg（LAL 法测定） |
| 来源物种 | Homo sapiens（人类） |
| 长期储存温度 | -80°C |
| 短期储存温度 | -20°C |
| 运输方式 | 干冰 / 蓝冰冷链运输 |
三、质控标准
| 质控项目 | 检测方法 | 标准要求 |
|---|---|---|
| SDS-PAGE 纯度分析 | 考马斯亮蓝染色 | >90% |
| 内毒素检测 | LAL 法 | <1 EU/μg |
| 浓度测定 | BCA 法 | — |
| 无菌检测 | 细菌及真菌培养 | 无污染 |
| 支原体检测 | PCR 法 | 阴性 |
| 生物负载检测 | 标准方法 | 符合标准 |
| 批次一致性 | ELISA 活性验证 | 每批次均经过验证 |
四、应用指南
4.1 ELISA
| 参数 | 推荐条件 |
|---|---|
| 推荐包被浓度 | 0.5-2 μg/mL |
| 包被缓冲液 | 碳酸盐缓冲液 pH 9.6 或 PBS |
| 包被条件 | 4°C 过夜（12-16 h） |
| 封闭液 | 1-3% BSA 或脱脂奶粉 |
| 封闭条件 | 室温 1-2 h |
| 血清稀释倍数 | 1:100-1:1000（根据预实验优化） |
| 脑脊液稀释倍数 | 1:10-1:50 |
| 二抗 | HRP-标记抗人 IgG |
| 显色底物 | TMB |
| 检测波长 | 450 nm |
4.2 Line Blot / 免疫印迹
| 参数 | 推荐条件 |
|---|---|
| 包被用量 | 0.1-0.5 μg/strip |
| 包被膜材质 | 硝酸纤维素膜（NC）或 PVDF 膜 |
| 封闭后血清稀释 | 1:50-1:200 |
| 脑脊液稀释 | 1:10-1:50 |
| 孵育条件 | 室温 1 h |
| 后续步骤 | 洗涤后加入酶标二抗，显色观察 |
| 用途说明 | 作为组织 IFA 的补充验证方法，提高抗 NCDN 抗体检测的特异性与灵敏度；对于海马突触型染色模式阳性但抗原未确认的样本，可作为确诊手段 |
4.3 Western Blot
| 参数 | 推荐条件 |
|---|---|
| 推荐上样量 | 0.5-2 μg/泳道 |
| SDS-PAGE 凝胶浓度 | 8-10% |
| 转膜方式及条件（湿转） | 100 V，1 h |
| 转膜方式及条件（半干转） | 25 V，30 min |
| 封闭液 | 5% 脱脂奶粉 |
| 封闭条件 | 室温 1 h |
| 一抗稀释倍数 | 1:500-1:2000（根据预实验优化） |
| 二抗 | HRP-标记抗人/兔 IgG |
| 二抗稀释倍数 | 1:5000-1:10000 |
4.4 免疫沉淀（IP / Co-IP）
| 参数 | 推荐条件 |
|---|---|
| 建议蛋白用量 | 1-5 μg/次 |
| 偶联方式 | 与 Protein A/G 磁珠或抗 His 抗体磁珠偶联 |
| 应用方向 | Neurochondrin 互作蛋白筛选，研究其与 mGluR5、CaMKII 信号通路及突触可塑性调控网络 |
五、储存与稳定性
| 储存条件 | 保存期限 | 备注 |
|---|---|---|
| -80°C | 12 个月以上 | 长期储存 |
| -20°C | 6 个月 | 短期储存 |
| 4°C（工作液） | 不超过 1 周 | 需避免细菌污染 |
| 反复冻融 | 严格避免 | 建议首次收到后根据实验用量分装保存 |
| 解冻方法 | 4°C 冰箱缓慢解冻，轻柔混匀 | 切勿剧烈漩涡 |
| 温度禁忌 | 切勿在 37°C 长时间孵育或反复加热 | — |
收到产品后注意事项：
立即检查包装完整性及冷链状态
六、安全注意事项
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 用途限制 | 仅供科研使用，不可用于临床诊断或治疗 |
| 个人防护 | 操作时请穿戴实验服、一次性手套及护目镜 |
| 接触预防 | 避免吸入、摄入或与皮肤、眼睛接触 |
| 应急处理 | 如不慎接触，立即用大量清水冲洗并就医 |
| 废弃物处理 | 按实验室生物安全规范处理 |
| 防火注意 | 缓冲液含戊二醇和甘油，请注意防火 |
七、订购信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品编号 | AB-P016 |
| 产品名称 | Neurochondrin 重组蛋白 |
| 规格选项 | 50μg / 100μg / 1mg / 批量定制 |
| 最小起订量 | 50μg |
| 货期（现货） | 3-5 个工作日 |
| 货期（定制） | 2-3 周 |
| 运输方式 | 蓝冰 / 干冰运输 |
| 质保期 | 自发货之日起 12 个月（-80°C 储存） |
| 随附文件 | 附带 COA（Certificate of Analysis） |
八、联系方式
艾柏森生物科技有限公司（Abiocenter Biotechnology Co., Ltd.）
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 电话 | 0510-85996916 |
| 邮箱 | support@abiocenter.com.cn |
| 网址 | www.abiocenter.com.cn |
| 地址 | 江苏省无锡市惠山经济开发区惠山大道1699号生命园C8栋二层 |
编号
AB-P016
