CV2 (DPYSL5) 重组蛋白
CV2 (DPYSL5) 重组蛋白
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基本信息

项目内容
产品编号AB-P002
蛋白名称Dihydropyrimidinase-Like 5 / DPYSL5 / CV2 / CRMP5
别名CRMP5, CV2, ULIP6, DRP-5, DHPASE-like Protein 5
基因 ID56896
UniProtQ9BPU6
来源物种Homo sapiens (Human)
表达宿主Escherichia coli (E. coli)
氨基酸区段全长蛋白 (1–564 aa)
标签C-terminal 6×His Tag
预测分子量~62.3 kDa (理论值)
表观分子量~62 kDa (SDS-PAGE)
纯度>95% (SDS-PAGE验证)
内毒素<1.0 EU/μg (LAL法)
缓冲液1×PBS, pH 7.4, 含10%甘油
规格100 μg / 1 mg / 定制
运输条件蓝冰 / 干冰运输
储存条件-20°C短期,-80°C长期,避免反复冻融

产品概述

CV2(又称DPYSL5或CRMP5)属于二氢嘧啶酶样蛋白(DPYSL/CRMP)家族成员,由564个氨基酸组成,分子量约62 kDa。该蛋白在中枢及外周神经系统中高表达,主要参与神经元发育、轴突导向、树突生长调控及微管动态重组等关键生物学过程。

CV2是抗CV2/CRMP5抗体介导的副肿瘤性神经综合征(PNS)的核心靶抗原之一。该自身抗体主要见于小细胞肺癌(SCLC)、胸腺瘤等患者,临床可表现为周围神经病、小脑共济失调、边缘叶脑炎、Lambert-Eaton综合征等多种神经系统副肿瘤症状。检测血清中抗CV2抗体对PNS的早期诊断与肿瘤筛查具有重要意义。

本品采用大肠杆菌(E. coli)表达系统,经Ni-NTA亲和层析与凝胶过滤多步纯化,复性后获得高纯度可溶性蛋白。本产品适用于抗CV2自身抗体的ELISA检测、线性印迹(Line Blot)、标准品制备、免疫原制备及体外功能研究等多种科研场景。

产品特点

  • 全长人源CV2(DPYSL5)重组蛋白,保留完整抗原表位

  • E. coli原核表达体系,产量高、批间一致性好

  • 经包涵体复性工艺处理,获得正确折叠的可溶性蛋白

  • SDS-PAGE验证纯度>95%,目的条带单一清晰(~62 kDa)

  • 内毒素水平<1.0 EU/μg,适合免疫及细胞实验

  • 经抗CV2/CRMP5阳性患者血清验证抗原活性

  • 可作为免疫原用于抗CV2多克隆/单克隆抗体制备

  • 适用于ELISA、Line Blot、WB、IP等多种下游应用

质控数据

SDS-PAGE 分析

取纯化后的CV2(DPYSL5)重组蛋白进行12% SDS-PAGE还原电泳分析,上样量2 μg。结果显示:目标蛋白在~62 kDa处呈现单一清晰条带,与预测分子量一致,无明显杂蛋白及降解条带。

本产品采用pET22b(+)表达载体构建,E. coli原核表达系统,经包涵体诱导表达后,Ni-NTA亲和层析捕获,再通过梯度尿素复性工艺获得可溶性蛋白,最终凝胶过滤纯化除聚集体。每批次产品均附SDS-PAGE胶图与浓度测定报告,确保批间一致性。

检测项目标准要求检测结果
纯度>95%合格 ✓
分子量~62 kDa合格 ✓
杂蛋白无明显杂带合格 ✓
降解条带无明显降解合格 ✓

线性印迹(Line Blot)验证

将纯化的CV2(DPYSL5)重组蛋白与对照样品分别固定于硝酸纤维素膜条上,采用抗CV2/CRMP5自身抗体阳性患者血清进行线性印迹检测。结果显示:

CV2(DPYSL5)条带处呈现清晰的阳性信号,表明本产品具有良好的抗原反应性与免疫原性,能够被临床确诊的PNS患者血清中的特异性抗体所识别。Control对照条带无信号,证实检测特异性良好。

该结果充分证明本产品可作为Line Blot诊断试剂的包被抗原,适用于副肿瘤性神经综合征的自身抗体血清学筛查、临床诊断及科研应用。

检测项目标准要求检测结果
CV2条带阳性清晰阳性信号合格 ✓
阴性对照无信号合格 ✓
抗原性验证临床血清识别合格 ✓
特异性无非特异性结合合格 ✓

使用方法

复溶: 本品以液体形式提供,无需复溶。如需稀释,建议使用1×PBS(pH 7.4)缓冲液。

ELISA检测: 推荐包被浓度0.5–2 μg/mL,溶于碳酸盐缓冲液(pH 9.6)或PBS,4°C包被过夜。

线性印迹(Line Blot): 将蛋白稀释至0.2–0.5 mg/mL,点膜于硝酸纤维素膜上,室温干燥后进行封闭与抗体孵育。

Western Blot: 上样量建议0.5–2 μg/泳道,采用12% SDS-PAGE分离,转膜后进行免疫检测。

免疫沉淀(IP/Co-IP): 建议使用5–10 μg蛋白与抗His-tag磁珠偶联后作为诱饵进行免疫沉淀实验。

动物免疫: 作为免疫原时,建议每只动物每次免疫50–100 μg蛋白,配合佐剂使用。

应用方向

应用领域说明
ELISA标准品作为包被抗原或定量标准品,用于抗CV2/CRMP5自身抗体的血清学检测及定量分析
线性印迹(Line Blot)作为膜条检测靶点,用于PNS患者血清中抗CV2自身抗体的临床诊断及阳性对照
免疫原制备用于兔、小鼠等动物免疫,制备高特异性抗CV2多克隆或单克隆抗体
免疫沉淀IP/Co-IP作为诱饵蛋白用于CV2互作蛋白筛选,研究副肿瘤性神经综合征的分子机制
功能学研究用于CV2在神经元轴突导向、微管动态调控及肿瘤发生中的功能与机制研究
抗独特型抗体开发用于开发抗独特型抗体,支持免疫原性及药代动力学研究

储存与稳定性

储存条件稳定性
收到后处理收到后请立即检查包装完整性,如有破损请联系供应商
-20°C储存可稳定保存6个月,适合短期使用
-80°C储存可稳定保存12个月以上,适合长期保存
分装建议避免反复冻融,建议根据实验用量分装后保存
解冻方法使用前于4°C缓慢解冻并轻柔混匀,避免剧烈涡旋
注意事项切勿在37°C长时间孵育;避免接触强酸、强碱环境

订购信息

项目内容
产品编号AB-P002
规格100 μg / 1 mg / 批量定制
最小起订量100 μg
货期现货,3–5个工作日
运输方式蓝冰 / 干冰运输
定制服务接受OEM定制及大客户协议价

注意事项

  1. 本产品仅供科研使用,不可用于临床诊断或治疗。

  2. 使用前请仔细阅读产品说明书,按照推荐条件储存和使用。

  3. 操作时请佩戴适当的个人防护装备(手套、实验服等)。

  4. 避免反复冻融,建议分装保存以保持蛋白活性。

  5. 本产品含甘油,使用时请根据实验需求调整缓冲液组分。

  6. 如发现产品异常(沉淀、变色等),请停止使用并联系供应商。

  7. 不同批次产品间可能存在微小差异,建议同一实验使用同一批次产品。

联系方式

艾柏森生物科技有限公司 Abiocenter Biotechnology

电话:0510-85996916

邮箱:support@abiocenter.com.cn

网址:www.abiocenter.com.cn

地址:江苏省无锡市惠山经济开发区惠山大道1699号生命园C8栋二层


编号
AB-P002