全长人源CV2 (DPYSL5)重组蛋白
全长人源CV2 (DPYSL5)重组蛋白
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一、产品概述

CV2(又称 DPYSL5 或 CRMP5,Collapsin Response Mediator Protein 5)属于二氢嘧啶酶样蛋白(DPYSL/CRMP)家族成员,由 564 个氨基酸组成,分子量约 62 kDa。该蛋白在中枢及外周神经系统中高表达,主要参与神经元发育、轴突导向、树突生长调控及微管动态重组等关键生物学过程。

CV2 是 抗 CV2/CRMP5 抗体介导的副肿瘤性神经综合征(PNS) 的核心靶抗原之一。该自身抗体主要见于小细胞肺癌(SCLC)、胸腺瘤等患者,临床可表现为周围神经病、小脑共济失调、边缘叶脑炎、Lambert-Eaton 综合征等多种神经系统副肿瘤症状。检测血清中抗 CV2 抗体对 PNS 的早期诊断与肿瘤筛查具有重要意义。

本品采用 大肠杆菌(E. coli)表达系统,经 Ni-NTA 亲和层析与凝胶过滤多步纯化,复性后获得高纯度可溶性蛋白。


二、技术规格

项目规格
产品编号AB-P002
蛋白名称Dihydropyrimidinase-Like 5 / DPYSL5 / CV2 / CRMP5
别名CRMP5, CV2, ULIP6, DRP-5, DHPASE-like Protein 5
基因 ID / UniProtGene ID: 56896 | UniProt: Q9BPU6
来源物种Homo sapiens (Human)
表达宿主Escherichia coli (E. coli)
氨基酸区段全长蛋白 (Full Length, 1–564 aa)
标签C-terminal 6×His Tag
预测分子量~62.3 kDa (理论值)
表观分子量~62 kDa (SDS-PAGE)
纯度>95% (经 SDS-PAGE 验证)
内毒素<1.0 EU/μg (LAL 法)
缓冲液1×PBS, pH 7.4, 含 10% 甘油
规格100 μg / 1 mg / 定制
运输条件蓝冰 / 干冰运输
储存条件-20°C 短期(6个月),-80°C 长期(12个月以上),避免反复冻融

三、产品亮点

  • 全长人源 CV2 (DPYSL5) 重组蛋白,保留完整抗原表位

  • E. coli 原核表达体系,产量高、批间一致性好

  • 经包涵体复性工艺处理,获得正确折叠的可溶性蛋白

  • SDS-PAGE 验证纯度 >95%,目的条带单一清晰(~62 kDa)

  • 经 抗 His-tag 抗体 Western Blot 验证抗原性

  • 可作为免疫原用于抗 CV2 多克隆/单克隆抗体制备

  • 适用于 ELISA、Line Blot、WB、IP 等多种下游应用

  • 提供 100 μg / 1 mg 灵活包装规格


四、质控数据

4.1 SDS-PAGE 分析

取纯化后的 CV2 重组蛋白进行 12% SDS-PAGE 还原电泳分析,上样量 2 μg。结果显示:目标蛋白在 ~62 kDa 处呈现单一清晰条带,与预测分子量一致,无明显杂蛋白及降解条带。

  • 表达系统:pET22b(+) 表达载体,E. coli 原核表达

  • 纯化工艺:包涵体诱导表达 → Ni-NTA 亲和层析 → 梯度尿素复性 → 凝胶过滤除聚集体

  • 批间一致性:每批次附 SDS-PAGE 胶图与浓度测定报告

检测项目标准要求检测结果
纯度>95%合格 ✓
分子量~62 kDa合格 ✓
杂蛋白无明显杂带合格 ✓
降解条带无明显降解合格 ✓

4.2 线性印迹(Line Blot)验证

将纯化的 CV2 重组蛋白与对照样品分别固定于硝酸纤维素膜条上,采用抗 CV2/CRMP5 自身抗体阳性患者血清进行检测。结果显示:

  • CV2 条带呈现清晰的阳性信号,表明产品具有良好的抗原反应性与免疫原性

  • Control 对照条带无信号,证实检测特异性良好

该结果证明本产品可作为 Line Blot 诊断试剂的包被抗原,适用于副肿瘤性神经综合征的自身抗体血清学筛查、临床诊断及科研应用。

检测项目标准要求检测结果
CV2 条带阳性清晰阳性信号合格 ✓
阴性对照无信号合格 ✓
抗原性验证临床血清识别合格 ✓
特异性无非特异性结合合格 ✓

五、使用方法

应用场景推荐操作
复溶液体形式,无需复溶;稀释建议使用 1×PBS (pH 7.4)
ELISA包被浓度 0.5–2 μg/mL,溶于碳酸盐缓冲液 (pH 9.6) 或 PBS,4°C 包被过夜
线性印迹 (Line Blot)稀释至 0.2–0.5 mg/mL,点膜于硝酸纤维素膜,室温干燥后封闭与抗体孵育
Western Blot上样量 0.5–2 μg/泳道,12% SDS-PAGE 分离,转膜后免疫检测
免疫沉淀 (IP/Co-IP)5–10 μg 蛋白与抗 His-tag 磁珠偶联后作为诱饵
动物免疫每次免疫 50–100 μg 蛋白,配合佐剂使用

六、应用方向

应用领域说明
ELISA 标准品作为包被抗原或定量标准品,用于抗 CV2/CRMP5 自身抗体的血清学检测及定量分析
线性印迹 (Line Blot)作为膜条检测靶点,用于 PNS 患者血清中抗 CV2 自身抗体的临床诊断及阳性对照
免疫原制备用于兔、小鼠等动物免疫,制备高特异性抗 CV2 多克隆或单克隆抗体
免疫沉淀 IP / Co-IP作为诱饵蛋白用于 CV2 互作蛋白筛选,研究副肿瘤性神经综合征的分子机制
功能学研究用于 CV2 在神经元轴突导向、微管动态调控及肿瘤发生中的功能与机制研究
抗独特型抗体开发用于开发抗独特型抗体(Anti-Idiotype),支持免疫原性及药代动力学研究

七、储存与稳定性

储存条件稳定性
收到后处理立即检查包装完整性,如有破损请联系供应商
-20°C 储存可稳定保存 6 个月,适合短期使用
-80°C 储存可稳定保存 12 个月以上,适合长期保存
分装建议避免反复冻融,建议根据实验用量分装后保存
解冻方法使用前于 4°C 缓慢解冻并轻柔混匀,避免剧烈涡旋
注意事项切勿在 37°C 长时间孵育;避免接触强酸、强碱环境

八、订购信息

项目信息
产品编号AB-P002
规格100 μg / 1 mg / 批量定制
最小起订量100 μg
货期现货 3–5 个工作日
运输方式蓝冰 / 干冰运输
定制服务接受 OEM 定制及大客户协议价

九、注意事项

  1. 本产品仅供科研使用,不可用于临床诊断或治疗。

  2. 使用前请仔细阅读产品说明书,按照推荐条件储存和使用。

  3. 操作时请佩戴适当的个人防护装备(手套、实验服等)。

  4. 避免反复冻融,建议分装保存以保持蛋白活性。

  5. 本产品含甘油,使用时请根据实验需求调整缓冲液组分。

  6. 如发现产品异常(沉淀、变色等),请停止使用并联系供应商。

  7. 不同批次产品间可能存在微小差异,建议同一实验使用同一批次产品。


十、联系方式

艾柏森生物科技有限公司
电话: 0510-85996916
邮箱: support@abiocenter.com.cn
网址: www.abiocenter.com.cn
地址: 江苏省无锡市惠山经济开发区惠山大道1699号生命园C8栋二层

编号
AB-P002