- 产品详情
- 产品参数
一、产品概述
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 人源 Amphiphysin 重组蛋白（全长，His 标签） |
| 产品编号 | AB-P011 |
| 版本 | V1.0 |
| 发布日期 | 2026-07-14 |
蛋白简介
Amphiphysin（Amphiphysin-1）由人类AMPH基因（Gene ID: 273）编码，是BAR超家族成员之一，属于突触囊泡相关蛋白。全长695个氨基酸，单体理论分子量约76.3 kDa，生理条件下以二聚体形式（约128 kDa） 存在于突触前末梢细胞质膜内侧。
结构组成
| 功能域 | 氨基酸位置 | 功能 |
|---|---|---|
| N-BAR结构域 | aa 26-236 | 介导蛋白二聚化，感知和诱导膜曲率 |
| 中间Clathrin/AP-2结合域 | — | 结合网格蛋白及衔接蛋白AP-2复合物 |
| C-SH3结构域 | aa 623-694 | 招募Dynamin、Synaptojanin等内吞关键蛋白 |
生物学功能
通过BAR结构域感知和诱导突触囊泡膜曲率，SH3结构域招募Dynamin等内吞蛋白，协同驱动网格蛋白介导的突触囊泡内吞循环，维持突触前神经递质释放-回收平衡。
临床意义
Amphiphysin是副肿瘤性僵人综合征（Stiff-Person Syndrome, SPS）的特征性自身抗原。约90%的抗Amphiphysin抗体阳性患者伴有恶性肿瘤（以乳腺癌最常见，其次为小细胞肺癌SCLC）。抗Amphiphysin抗体可导致GABA能抑制性中间神经元功能障碍，临床表现为进行性躯干及四肢肌肉僵硬、痛性痉挛，可伴脑干脑炎、脊髓病、小脑性共济失调及周围神经病变。
二、产品参数
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品编号 | AB-P011 |
| 蛋白全称 | Amphiphysin (Amphiphysin-1) |
| 常用别名 | AMPH1 |
| 来源物种 | Homo sapiens（人类） |
| UniProt登录号 | P49418 |
| Gene ID | 273 |
| 基因位置 | Chr 7p14.1 |
| 氨基酸序列 | 全长，1-695 aa |
| 表达系统 | 大肠杆菌（E. coli） |
| 标签 | N端6×His标签 |
| 蛋白结构 | N-BAR结构域 + Clathrin/AP-2结合域 + C-SH3结构域 |
| 预测分子量 | ~76.3 kDa（含标签） |
| SDS-PAGE实测分子量 | ~76 kDa（单体）；~128 kDa（二聚体，非还原条件） |
| 纯度 | >90%（SDS-PAGE凝胶成像分析） |
| 内毒素水平 | <1.0 EU/μg（LAL鲎试剂法） |
| 外观 | 无色澄清液体 |
| 缓冲液 | 20 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 10%甘油, pH 8.0 |
| 浓度 | 1.0 mg/mL（以批次COA为准） |
| 包装规格 | 100 μg / 1 mg / 批量定制 |
| 储存条件 | -80°C（长期）；-20°C（短期） |
| 运输条件 | 蓝冰或干冰冷链运输 |
| 有效期 | 自出货之日起12个月（-80°C储存） |
三、质量控制
| 检测项目 | 方法 | 标准 |
|---|---|---|
| 纯度 | SDS-PAGE + 凝胶成像灰度扫描 | >90% |
| 抗原活性 | Line Blot（阳性血清/抗His-tag抗体检测） | 特异性显色条带合格 |
| 内毒素 | LAL鲎试剂法（凝胶法） | <1.0 EU/μg |
| 蛋白浓度 | BCA法（BSA标准曲线） | 附浓度测定报告 |
3.1 SDS-PAGE
还原电泳后经考马斯亮蓝R-250染色，目标蛋白在~76 kDa处呈现单一主条带。非还原条件下可见~128 kDa二聚体条带。
3.2 Line Blot抗原活性检测
蛋白划线至NC膜，封闭后与抗Amphiphysin阳性血清或抗His-tag抗体孵育，HRP标记二抗检测，TMB显色。检测线出现清晰特异性显色条带，判定为合格。
四、应用指南
4.1 ELISA
| 步骤 | 参数 |
|---|---|
| 包被浓度 | 1-5 μg/mL |
| 包被条件 | 碳酸盐缓冲液，pH 9.6，4°C过夜 |
| 封闭 | 5%脱脂奶粉/PBST，37°C，1 h |
| 血清稀释度 | 1:100-1:500 |
| 二抗 | HRP-抗人IgG，1:5000-1:10000 |
| 检测 | TMB显色，450 nm读数 |
用途：作为包被抗原或定量标准品，用于抗Amphiphysin自身抗体的血清学检测及定量分析。
4.2 线性印迹（Line Blot）/ 免疫印迹
| 步骤 | 参数 |
|---|---|
| 划膜浓度 | 0.2-0.5 mg/mL |
| 载体 | 硝酸纤维素膜（NC膜） |
| 血清稀释度 | 1:100-1:200 |
| 孵育条件 | 室温，1 h |
| 检测 | HRP-抗人IgG，TMB显色 |
用途：作为膜条检测靶点，用于SPS/副肿瘤性神经综合征患者血清中抗Amphiphysin自身抗体的临床诊断与分型确认。
4.3 Western Blot（阳性对照）
| 步骤 | 参数 |
|---|---|
| 上样量 | 50-100 ng/孔 |
| 检测抗体 | 抗His-tag抗体或抗Amphiphysin抗体 |
| 用途 | Amphiphysin表达检测、抗体效价评估、特异性验证 |
4.4 免疫原制备
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 首次免疫剂量 | 100-200 μg/只 |
| 加强免疫剂量 | 50-100 μg/只 |
| 佐剂 | 与弗氏佐剂1:1乳化 |
| 注射方式 | 皮下多点注射 |
| 适用动物 | 兔、小鼠等 |
用途：制备高特异性抗Amphiphysin多克隆或单克隆抗体。
4.5 免疫沉淀（IP / Co-IP）
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 捕获抗体 | 2-5 μg抗Amphiphysin抗体或抗His-tag抗体 |
| 互作蛋白 | Dynamin-1、Synaptojanin、Endophilin等 |
| 用途 | 蛋白-蛋白相互作用研究、突触囊泡内吞调控网络探索 |
4.6 蛋白-蛋白 / 蛋白-脂质结合实验
BAR结构域：可结合含特定曲率的脂质膜
SH3结构域：可结合含PXXP基序的蛋白配体
用途：膜曲率感知及蛋白互作网络研究的纯化蛋白工具。
五、储存与稳定性
| 条件 | 说明 |
|---|---|
| -80°C | 长期储存（推荐），可稳定保存≥12个月 |
| -20°C | 短期储存，可稳定保存≤6个月 |
| 4°C | 解冻后临时储存，建议1周内使用完毕 |
| 反复冻融 | 应避免。建议首次使用前分装保存于-80°C。超过3次冻融循环可能导致蛋白降解或活性下降 |
| 运输 | 蓝冰或干冰冷链运输。收到后请立即按推荐条件储存 |
使用前操作
于4°C轻柔解冻
轻柔混匀（切勿剧烈涡旋震荡）
请勿在37°C长时间孵育
六、安全与注意事项
用途限制：本品仅供科研使用（Research Use Only），不可用于人体或动物的治疗、诊断或预防目的。
个人防护：操作时请佩戴适当的个人防护装备（手套、实验服、护目镜）。
粘度注意：本品含10%甘油，低温下可能呈粘稠状，使用前请于4°C轻柔解冻并混匀。
避免震荡：避免剧烈涡旋震荡，以防止蛋白变性或聚集。
废弃物处理：废弃产物应按照实验室生物安全相关规定进行处置。
应急处理：如不慎接触皮肤或眼睛，立即用大量清水冲洗并就医。
七、订购信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品编号 | AB-P011 |
| 产品名称 | 人源 Amphiphysin 重组蛋白（全长，His标签） |
| 规格 | 100 μg / 1 mg / 批量定制 |
| 最小起订量 | 100 μg |
| 货期 | 现货3-5个工作日 |
| 运输方式 | 蓝冰/干冰冷链运输 |
| 定制服务 | 可承接OEM定制包装、批量规格及内毒素更低版本 |
八、联系方式
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 公司名称 | 艾柏森生物科技有限公司（Abiocenter Biotechnology） |
| 电话 | 0510-85996916 |
| 邮箱 | support@abiocenter.com.cn |
| 网址 | www.abiocenter.com.cn |
| 地址 | 江苏省无锡市惠山经济开发区惠山大道1699号生命园C8栋二层 |
