艾柏森重组辣根过氧化物酶(rHRP)
艾柏森重组辣根过氧化物酶(rHRP)
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一、产品概述

辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)是生命科学研究与临床诊断领域应用最为广泛的标记酶之一,全球超过70%的免疫检测试剂盒采用HRP作为核心信号放大元件。

传统HRP从辣根植物中天然提取,长期面临三大痛点:植物来源不确定性带来的动物源成分风险、受原料品质影响的批次一致性差、以及受季节地域制约的供应稳定性受限。

艾柏森(江苏)生物科技有限公司依托多年重组蛋白表达与纯化技术积累,成功开发出原核大肠杆菌表达的重组辣根过氧化物酶(rHRP) ,从基因构建到产品放行全程可控,从根源上解决了天然提取的固有局限,为生命科学研究与工业应用提供安全、稳定、高效的替代方案。

二、产品基本信息

项目内容
产品中文名重组辣根过氧化物酶
产品英文名Recombinant Horseradish Peroxidase
缩写rHRP
目录号abiocenter-rHRP-001
表达系统原核 · 大肠杆菌(E. coli)
分子量~44 kDa
来源属性无动物源成分(Animal-Free)
CAS号参考9003-99-0(HRP)
产品形态浅棕色冻干粉

三、产品核心优势

3.1 无动物源成分,安全合规

rHRP为重组表达产物,不含任何动物源成分,彻底规避了天然植物提取过程中可能引入的病原体、过敏原等污染风险,满足生物安全与法规合规要求,适用于对原料来源有严格限制的应用场景。

3.2 高纯度、高活性

采用多步层析纯化工艺,SDS-PAGE验证蛋白纯度>95% ,酶活性≥250 U/mg(ABTS法),确保催化反应的高灵敏度与精准度,实验结果清晰可靠。

3.3 批次一致性优异

与天然提取产品批次间差异显著的弊端不同,rHRP来自标准化发酵生产,近三个连续批次核心指标波动范围均在可接受区间内,实验结果可重复、可信赖,有效避免因原料波动导致的实验失败风险。

3.4 规模化供应,成本可控

大肠杆菌发酵量产模式,不受植物原料季节性、地域性的制约,可实现稳定规模化供应。同时重组表达成本可控,性价比远超天然提取产品。

3.5 全流程品质保障

从基因克隆与表达载体构建,到大肠杆菌发酵培养与多步层析纯化,再到成品的质量检测与批次放行,每一环节均设有明确的质量关卡(QC Checkpoint),确保不合格品不流入下一环节,成品放行须经质量授权人签字确认。

四、应用领域详解

rHRP凭借高纯度、高活性、无动物源及批次一致性等优势,在以下六大领域展现出不可替代的价值:

4.1 ELISA检测

作为酶联免疫吸附测定中的核心标记酶,rHRP催化底物产生高灵敏度显色信号,确保检测结果的精确与可靠。适用于夹心法、间接法、竞争法等多种ELISA类型。

4.2 Western Blot

蛋白质印迹分析中作为酶标记二抗的信号放大系统,rHRP具有低背景、强信号的特点,使目标蛋白的检测更加精准,适用于化学发光法与比色法检测。

4.3 免疫组化(IHC)

在组织切片的原位检测与抗原定位中,rHRP稳定的酶活性保障染色效果的均一与清晰,显色定位准确,背景干净。

4.4 生物传感器

临床诊断试剂的核心酶组分,rHRP的高稳定性与低成本特性,助力H₂O₂检测与电化学信号放大,推动精准医疗的普及与推广。

4.5 核酸探针标记

分子杂交与核酸检测中的信号放大标记酶,rHRP有效提升检测灵敏度与特异性,适用于原位杂交(ISH)等应用。

4.6 细胞化学染色

细胞形态学与功能分析中,rHRP催化底物产生的可视化信号使细胞结构清晰可辨,适用于免疫细胞化学染色等实验。

五、使用操作方法

5.1 溶解与配制

  1. 将冻干粉rHRP用适量无菌超纯水或PBS缓冲液(pH 7.0-7.4) 溶解。

  2. 轻轻混匀,避免剧烈振荡或涡旋,防止蛋白变性。

  3. 推荐初始浓度为1 mg/mL,可根据具体应用稀释至所需工作浓度。

  4. 溶解后的酶液建议分装至小体积(单次用量),避免反复冻融。

5.2 ELISA实验使用建议

  • rHRP可替代天然HRP用于抗体标记、酶结合物制备。

  • 推荐工作浓度范围:1:5000 ~ 1:20000稀释度,具体需根据ELISA方案优化。

  • TMB显色反应时间通常为15-30分钟,可根据信号强度调整终止时间。

  • 重要提示:含HRP的溶液中不可加入叠氮钠(NaN₃) 作防腐剂,叠氮钠会不可逆抑制HRP酶活性。

5.3 酶活性测定方法

ABTS法:取适量酶液加入含ABTS底物(0.5 mM)和H₂O₂(0.3 mM)的反应缓冲液(pH 5.0,醋酸缓冲液)中,37°C反应,405 nm波长读取吸光度变化。

TMB法:取适量酶液加入含TMB底物的反应体系中,37°C反应后加入终止液(2M H₂SO₄),450 nm波长读取吸光度。

酶活性单位定义:在规定条件下,每分钟催化1 μmol底物转化所需的酶量为1个活性单位(U)。

5.4 注意事项

  • 首次使用建议进行预实验,根据具体反应体系和检测要求优化rHRP的用量与反应条件。

  • 不同底物(TMB、ABTS、DAB等)的最适反应参数可能有所差异,请参考相应底物说明书。

  • 酶液稀释建议使用含0.1% BSA的PBS缓冲液,有助于保持酶活稳定性。

六、储存与运输要求

6.1 储存条件

储存条件产品状态保存期限
-20°C冻干粉(长期储存)可稳定保存24个月
4°C冻干粉(短期储存)建议不超过6个月
-20°C液态溶液(分装储存)建议1个月内使用
4°C液态溶液建议1周内使用

6.2 储存注意事项

  • 避免反复冻融:溶解后请立即分装成单次用量,每次取用一管,剩余分装冻存。

  • 冻干粉开瓶后请尽快使用或密封保存,注意防潮。

  • 液态溶液在室温(25°C)放置超过7天可能导致酶活性显著下降,应尽量避免。

  • 长期不使用时,推荐保持冻干粉状态于-20°C储存。

6.3 运输要求

  • 建议使用冷链运输(干冰或冰袋),全程保持低温。

  • 避免高温环境和剧烈震动。

  • 收货后请立即按照储存条件妥善保存。

七、常见问题与解决方案

Q1:rHRP与天然HRP有何区别?

A:rHRP为重组表达产物,无动物源成分,批次一致性更优、纯度高(>95%);天然HRP从辣根植物提取,存在批次差异大(纯度60%-80%)、植物源污染风险与供应受限等问题。

Q2:rHRP能否直接替代天然HRP?

A:在大多数ELISA、Western Blot、IHC等免疫检测应用中可直接替代使用。因不同实验体系和底物可能存在差异,建议首次使用前进行预实验验证最佳工作浓度与反应条件。

Q3:溶解后酶活性下降如何处理?

A:①确保使用无菌超纯水或PBS溶解;②溶解后立即分装,避免反复冻融;③分装后-20°C保存,取用时置于冰上,避免室温长时间放置;④稀释时建议使用含0.1% BSA的缓冲液以稳定酶活。

Q4:rHRP溶液中能否添加防腐剂?

A:严禁添加叠氮钠(NaN₃) ,它会不可逆地抑制HRP酶活性。如需防腐,可考虑使用ProClin系列防腐剂(需验证与实验体系的兼容性)或不添加防腐剂、分装后冻存。

Q5:rHRP的保质期是多久?

A:冻干粉在-20°C储存条件下保质期为24个月,具体详见产品标签与COA文件。溶解后建议-20°C分装保存,1个月内使用完毕。

Q6:不同批次间rHRP的活性是否一致?

A:是的。艾柏森对近三个连续批次的核心指标(纯度、活性、内毒素、宿主蛋白残留)进行一致性对比,结果表明波动范围均在可接受区间内,产品批次间一致性良好,生产工艺稳定可控。

Q7:rHRP是否适用于化学发光检测系统?

A:是的。rHRP与天然HRP一样,可配合化学发光底物(如ECL、鲁米诺等)使用,适用于Western Blot化学发光检测。建议根据具体发光底物优化酶的工作浓度。

八、安全信息

安全项目信息备注
产品分类研究用试剂非临床诊断用途
动物源成分无重组表达,生物安全风险低
内毒素水平<1.0 EU/mg满足细胞培养级要求
生物安全等级BSL-1无致病微生物风险
危险化学品无产品本身不含有害化学品
个人防护常规实验室防护佩戴手套、实验服
废弃物处理按生物废弃物规范参照实验室废弃物管理规定

合规声明:本产品生产与质量控制严格遵循《中华人民共和国药典》、ISO 9001:2015质量管理体系、GMP指导原则等标准,为重组蛋白类研究用试剂。用于体外诊断(IVD)领域时,需另行符合IVD相关法规要求。

免责声明:本产品仅供科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗。使用者应自行评估产品在特定应用中的适用性。因不当使用造成的损失,公司不承担责任。

九、订购与技术支持

9.1 订购信息

目录号规格包装形式储存温度
abiocenter-rHRP-001-S1 mg冻干粉-20°C
abiocenter-rHRP-001-M10 mg冻干粉-20°C
abiocenter-rHRP-001-L100 mg冻干粉-20°C
abiocenter-rHRP-001-C定制规格冻干粉/液态-20°C

9.2 定制服务

如需大批量订购(>1 g)或特殊规格定制(如生物素标记rHRP、特定活性级别、特定缓冲液配方等),请联系我们的技术支持团队获取报价与技术方案。

9.3 技术支持

艾柏森(江苏)生物科技有限公司在重组蛋白领域深耕多年,积累了丰富的原核表达与蛋白纯化经验。我们不仅提供高品质的rHRP产品,更致力于为客户提供:

  • 全流程技术咨询:从选型到应用,一站式服务

  • 实验方案优化建议:协助客户建立最佳使用条件

  • 定制化解决方案:针对特殊需求提供个性化服务

9.4 联系我们

艾柏森(江苏)生物科技有限公司
abiocenter — 重组蛋白专业供应商

🌐 网址:www.abiocenter.com
📞 电话:0510-85996916

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